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常見技術問題

為什么實際的蛋白質印跡條帶大小與預期的不同?

發布日期:2015-03-03閱讀次數:3367

    蛋白質印跡是根據大小分離蛋白質的技術。通常,分子量越小的蛋白質在凝膠中的遷移速率越快。但是遷移速率也受其他因素影響,因此觀察到的實際條帶大小與預期的可能會有差別。常見因素包括:
  1. 翻譯后修飾 - 例如磷酸化、糖基化等,這些修飾會增加蛋白質的分子量。
  2. 翻譯后剪切 - 例如,很多蛋白質首先合成為前體蛋白,然后剪切形成活性形式,例如半胱天冬酶前體
  3. 剪接變體 - 通過選擇性剪接,可實現同一基因產生不同大小的蛋白質
  4. 相對電荷 -氨基酸的組成(帶電荷的氨基酸與未帶電荷的氨基酸各自所占的比例)
  5. 多聚體 - 例如,蛋白質二聚體。蛋白之間強烈的相互作用會造成條帶偏大,但采用還原條件通?梢员苊舛嗑垠w的形成。
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